// این سایت در پایگاه ساماندهی وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی ایران و درگاه ملی خدمات الکترونیک ایران ثبت شده است//

******* ******* ******* *******

       /   ایمونوگلوبولین -- •۲۱ بهمن ۱۳۹۱•  ::.        /   بيماري زبان آبی -- •۳۱ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- خاویار -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- آلایش خوراکی دام -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- عسل -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- شیر خام -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- تخم مرغ -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- میگو -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- ماهی -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- گوشت بوقلمون -- •۲۵ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- گوشت مرغ -- •۲۳ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- گوشت شترمرغ -- •۲۳ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   بهداشت فراورده های دامی- گوشت قرمز -- •۲۳ مرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   دارونامه جامع دامهای کوچک -- •۰۷ خرداد ۱۳۹۱•  ::.        /   سوگند نامه دامپزشکی -- •۲۳ اردیبهشت ۱۳۹۱•  ::.        /   خبر مهم: وضعیت خاص صنعت گاوداری -- •۱۸ اردیبهشت ۱۳۹۱•  ::.        /   عوامل شکست در واکسیناسیون طیور -- •۰۳ اردیبهشت ۱۳۹۱•  ::.        /   مدیریت جوجه های گوشتی در هفته اول پرورش -- •۰۳ اردیبهشت ۱۳۹۱•  ::.        /   مواد ضد عفوني كننده وعملكرد آن ها -- •۳۰ فروردین ۱۳۹۱•  ::.        /   راهنمائي هاي خاص براي بخار دادن در جوجه كشي ها -- •۳۰ فروردین ۱۳۹۱•  ::.
ورود کاربران



نظرسنجی
تعداد دانشکده های دامپزشکی کشور باید ...
 
كیفیت مطالب ارائه شده در سایت دامپزشکان برتر را چگونه ارزیابی می كنید؟
 
صفحه اصلی علوم آزمایشگاهی کلون کردن سلول cloning

کلون کردن سلول cloning

(0 •امتیاز•)

درصدی از سلولهای لاین در اثر پاساژهای مکرر و برخی عوامل شیمیایی دچار موتاسیون می شوند. کلونینگ سلولها جهت جداسازی موتانتهای خاص و استرین های سلولی و در نهایت کاهش هتروجنسیتی Heterogencity در کشت سلولها می باشد.

وسایل و تجهیزات

لامینار فلو، انکوباتور c°37 با دیاکسیدکربن 5% ، میکروسکوپ اینورت، سمپلر 8 کاناله با سرسمپلر 100 میکرو لاندی، لوله آزمایش استریل، پیپت در سایزهای 1،2 و 10 میلی ، میکروپلیت 96 خانه ای، لام نئوبار، ورتکس، میکروتیوپ

 

مواد

محیط کشت ، سرم جنین گوساله، محلول تریپسین، فلاسک 25 سانتی مترمکعبی حاوی کشت سلول

روش کار

1-   داخل هریک از چهار لوله آزمایش 9 سی سی از محیط کشت سلول حاوی 10% سرم جنین گوساله بریزید.

2-   مشابه پاساژ سلول فلاسک کشت تریپسینه کرده و توسط پیپت 5 سی سی با محیط کشت سوسپانسیون غلیظی از سلول تهیه کنید.

3-   از سوسپانسیون سلول یک سی سی به لوله اول ریخته و توسط ورتکس خوب مخلوط کنید.

4-   با استفاده از لام نئوبار از رقت 10/1 برداشته و سلول را شمارش کنید.

5-   رقت سازی را ادامه دهید تا به نسبت 20-10 سلول در هر میلی تهیه شود.

6-   از آخرین رقت توسط توسط سمپلر داخل هر چاهک میکروپلیت 100 لاندا بریزید.

7-   درب میکروپلیت را گذاشته و مدت 3-1 هفته در انکوباتور c°37 قرار دهید.

8-   بطور روزانه هر یک از چاهکهای میکروپلیت را توسط میکروسکوپ اینورت و با لنز 10 کنترل نموده و چاهکهایی که دارای یک کلنی از سلول هستند علامت گذاری نمائید.

9-  با پر شدن چاهک از کلنی تک آنها را توسط سمپلر 100 لاندایی تریپسینه کرده و داخل چاهک میکروپلیت 25 خانه ای منتقل کنید.

10-   بتدریج کشت سلول کلون شده را به داخل فلاسک منتقل کنید و سپس در تانک ازت ذخیره نمایید.

•یادداشت خود را اضافه نمایید•

•نام شما•:
•ایمیل شما•:
•وب سایت شما•:
•موضوع•:
•یادداشت•:

به اشتراک گذاری این مطلب

 

نظر سنجی پرطرفدارترین بخش

به نظر شما چه مطالبی در سایت بیشتر درج شود؟
 
راهنمای سایت

برای دسترسی آسان به مطلب مورد نظر از منوی جستجو در بالا استفاده نمائید. جهت دسترسی موضوعی از منوی بخش ها در بالا مجموعه مورد نظر خود را پیدا کنید. برای دسترسی به همه مطالب، عکس ها و کتابها حتما در سایت عضو شوید.

عضویت در سایت

Info@Mainvets.com

•اعضا• : 5444
•محتوا• : 1894
•لینک وب ها• : 258
Designed by : Mojtaba Alimolaei | Mainvets